Прямая проба Кумбса

Общие сведения

Прямая проба Кумбса (антиглобулиновый тест)- положительная реакция определяет антитела (антиэритроцитарные антитела - анти-D, С, Е, с и е) или компоненты комплемента, фиксированные на поверхности эритроцитов в крови больных аутоиммунными гемолитическими анемиями. Отрицательная реакция не исключает иммунное заболевание, поскольку антитела могут находиться в свободном виде в плазме (не связанные с эритроцитами). Для их обнаружения проводят непрямую пробу Кумбса.

Показания к назначению: установление иммунной природы гемолитической анемии.

Положительная реакция выражается в том, что эритроциты больного человека, с фиксированными на них антителами, при взаимодействии с антиглобулиновой сывороткой (против антител), полученной после иммунизации кролика, агглютинируют. Прямая проба Кумбса проводится, когда есть основания предполагать, что исследуемые эритроциты уже in vivo подверглись сенсибилизации соответствующими антителами, т.е. первая фаза реакции - фиксация антител на поверхности эритроцитов уже произошла и добавление антиглобулиновой сыворотки вызывает агглютинацию сенсибилизированных клеток. Иными словами, положительная прямая реакция Кумбса подразумевает, что in vivo на поверхности эритроцитов имеются покрыты иммуноглобулины или комплемент.

С помощью прямой пробы Кумбса выявляют иммуноглобулины (антитела) на поверхности эритроцитов. Это иммуноглобулины, образующиеся в ответ на сенсибилизацию к каким-либо антигенам, например резус-фактору. Для постановки пробы сыворотку с антиглобулином (сыворотка Кумбса) добавляют к отмытым эритроцитам. Если на эритроцитах имеются иммуноглобулины или комплемент, происходит агглютинация. Проба называется прямой, так как она одноступенчатая - требует только добавления сыворотки Кумбса к отмытым эритроцитам.
 

Вернуться к оглавлению

Подготовка к диагностике

1. Если пациент — новорожденный, родителям следует объяснить, что исследование поможет диагностировать ГБН (гемолитическая болезнь новорожденного).
2. Если у пациента подозревают гемолитическую анемию, ему следует объяснить, что исследование позволит выяснить, обусловлена ли она иммунными нарушениями, приемом препаратов или другими причинами.
3. Каких-либо ограничений в диете или режиме питания не требуется.
4. Следует предупредить пациента (или родителей новорожденного), что для исследования понадобится взять кровь из вены, и сообщить ему, кто и когда будет делать венепункцию.
5. Следует предупредить о возможности неприятных ощущений во время наложения жгута на руку и венепункции.
6. Препараты, которые могут повлиять на результат пробы, следует отменить. К ним относятся хинидин, метилдофа, цефалоспорины, сульфаниламиды, хлорпромазин, дифенилгидантоин, этосуксимид, гидралазин, леводопа, мефенаминовая кислота, мелфалан, пенициллин, прокаинамид, рифампин, стрептомицин, тетрациклины, изониазид.
 

Вернуться к оглавлению

Процедуры

1. При проведении пробы у взрослого пациента после венепункции набирают кровь пробирки с ЭДТА.
2. У новорожденных берут кровь из пуповины в пробирку с ЭДТА.
3. Место венепункции придавливают ватным шариком до остановки кровотечения.
4. При образовании гематомы вместе венепункции назначают согревающие компрессы.
5. После взятия крови пациент может возобновить прием отмененных препаратов
6. Следует предупредить родителей новорожденного, что для контроля за динамикой анемии, возможно, потребуется повторное исследование.

 

Вернуться к оглавлению

Референтные значения

В норме прямая проба Кумбса отрицательная, что свидетельствует об отсутствии на поверхности эритроцитов антител и комплемента.
 

Вернуться к оглавлению

Факторы, влияющие на результат исследования

1. Гемолиз, обусловленный неосторожным обращением с пробой крови.
2. Ацетаминофен, p-салициловая кислота, аминопирин, антигистаминные препараты, карбромал, цефалоспорины, хлорированные углеводные инсектициды, хлорпромазин, хлорпропрамид, цисплатин, клонидин, дипирон, этосуксимид, фенфлюрамин, фуадин, гидралазин, гидрохлортиазид, ибупрофен, инсулин, изониазид, леводофа, мефенаминовая кислота, мелфалан, метадон, метилдофа, метилсергид, номифензин, пеницилламин, пенициллины, фенацетин, фенилбутазон, пробенецид, прокаинамид, хинидин, хинин, рифампин, стрептомицин, сульфонамиды, производные сульфонилмочевины, тетрациклин, триамтерен, тримеллитиновый ангидрид.
 

Вернуться к оглавлению

Цель исследования

1. Диагностика гемолитической болезни новорожденных.
2. Выяснение причины гемолитических трансфузионных реакций.
3. Дифференциальная диагностика гемолитических анемий, которые могут быть врожденными или обусловлены аутоиммунными реакциями или некоторыми препаратами.

 

Вернуться к оглавлению

Отклонения от нормы

Для определения антигенной специфичности антитела следует приготовить элюат. Обычно антитело имеет широкую специфичность, не ассоциированную с хорошо установленным антигеном.
Положительная реакция:
Аутоиммунная гемолитическая анемия:
Теплореактивные (37 С) аутоантитела, первичные (идиопатические) или вторичные, связанные с болезнью (например, при лимфоме или СКВ)
Холодореактивные аутоантитела.
1. Холодовая гемаагглютининовая болезнь, идиопатическая или связанная с болезнью (например, при лимфоме, пневмонии (анти - I), мононуклеозе. (анти - i))
2. Пароксизмальная холодовая гемоглобинурия, идиопатическая или связанная с болезнью (например, при вирусных инфекциях или сифилисе (анти - P)).
Лекарственная аутоиммунная гемолитическая анемия:
Лекарства, адсорбированные на эритроцитах (например, пенициллин)
Образующие иммунные комплексы (например, хинидин)
Неиммунологическая адсорбция белков (например, цефалоспорины)

Неизвестные механизмы (например, альдомет, т.е. альфа-метилдофа).
Аллоиммуная гемолитическая анемия:
Пассивно приобретенные антитела из введенных продуктов плазмы (например, после внутривенного введения иммуноглобулинов)
Реакция на переливание несовместимых эритроцитов.
Гемолитическая болезнь новорожденных (антитела (IgG) матери, проникшие через барьер плаценты).
Системная красная волчанка (СКВ).
 

Вернуться к оглавлению

Вверх